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RNeasy FFPE Kit Print
從福爾馬林固定,、石蠟包埋的組織切片中純化總RNA
創(chuàng)新的方法用于克服福爾馬林造成的交聯(lián)
有效的釋放RNA而不破壞其完整性
高效的實驗方案，在85分鐘內(nèi)即可獲得純化的RNA
RNeasy FFPE Kit專為從福爾馬林固定,、石蠟包埋的組織切片中純化總RNA而設(shè)計,。*的裂解和孵育條件逆轉(zhuǎn)福爾馬林對RNA的修飾。并且裂解緩沖液可將RNA從組織切片中有效釋放出來,，防止RNA的進一步降解,。試劑盒同樣使用
RNeasy FFPE Kit Print
貨號/ ID：73504
RNeasy FFPE套件（50）
50個RNeasy MinElute離心柱，收集管,，蛋白酶K,，無RNase的DNase I，DNase Booster緩沖液,，無RNase的緩沖液,，無RNase的水
原理
用福爾馬林固定組織會導致RNA-RNA和RNA-蛋白質(zhì)的交聯(lián)，這會影響RNA在酶學分析中的性能,。FFPE樣本固定和包埋同樣會導致核酸的嚴重片段化,。RNeasy FFPE Kit提供了*的裂解和孵育條件來逆轉(zhuǎn)福爾馬林對RNA的修飾。裂解緩沖液能使RNA從FFPE組織樣本中有效釋放,，并防止進一步的RNA降解,。經(jīng)優(yōu)化的條件能純化得到所有可用的RNA,，使用RNeasy FFPE Kit從FFPE樣本中得到的RNA的產(chǎn)量比其他方法更高,。
程序
整個RNeasy FFPE操作流程可在85分鐘內(nèi)完成（參見"RNeasy FFPE procedure"）。使用蛋白酶K裂解樣本僅需15分鐘,。裂解后,，樣本在80oC下孵育15分鐘。之后,，用DNase處理能有效去除樣本中的基因組DNA,，包括小的DNA/片段,。后，使用RNeasy MinElute離心柱即可收集純化的RNA,，洗脫體積14–30 µl,。
應用領(lǐng)域
RNeasy FFPE Kit可純化FFPE 樣本中所有大于70 nt RNA，得到適用于RT-PCR等眾多下游應用的RNA/片段,。但是,，從FFPE樣本中純化得到的RNA會嚴重片段化，不能用于需要完整RNA的下游應用,。如果使用片段化RNA可能需要做些修飾（例如在RT-PCR時設(shè)計小的擴增子）,。進行cDNA合成時，不能使用oligo-dT引物,，而要使用隨機或基因特異性引物,。
技術(shù)指標
特征 | 技術(shù)指標 |
| 應用 | PCR，qPCR,，實時RT-PCR,，微陣列 |
| 洗脫體積 | 14–30微升 |
| 規(guī)格 | 旋轉(zhuǎn)柱 |
| 主要樣本類型 | FFPE組織樣本 |
| 處理 | 手動（離心），自動化（QIAcube） |
| 純化總RNA,、miRNA,、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 | 核糖核酸 |
| 樣本量 | 1 * 5 µm至4 * 10µm切片 |
| 技術(shù) | 二氧化硅技術(shù) |
| 每次運行或制備時間 | 70分鐘 |
| 產(chǎn)量 | 變化 |
